Dediferensiasi dari sel somatik menjadi sel pluripoten biasanya melalui Reprograming Genetik dengan teknologi iPS (induced-Pluripotent Stem Cell) dengan transfer genetik faktor transkripsi Oct4, Sox2, cMyc dan Klf4. Dedifirensiasi dari sel somatik dengan Molekul Kecil (Small Molecule) biasanya tidak sampai mencapai sel pluripoten. Prinsip dediferensiasi dengan menginaktifkan gene-gene yang kearah diferensiasi somatik (dengan methilasi DNA) dan mengaktifkan gene-gene yang mengarah ke embrional (dengan demetilasi DNA) dan perubahan-perubahan khusus pada histon. Tetapi dengan Molekul Kecil yang baru kombinasi VC6TFZ yang terdiri Valproic acid (VA), CHIR990210 (CHIR), 616452 (Repsox), Tranylcypromine (T), Forskolin (F), 3-deazaneplanocin (Dznep), dan 4-[(E)-2-(5,6,7,8-Tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)-1-propenyl]benzoic acid (TTNPB), sel somatik dapat di reprogam menjadi sel pluripoten.
Pada penelitian ini digunakan sel mononuklir yang diisolasi dari sel darah tepi. Sel darah tepi mononuklir dibiakkan selama 6 hari pada medium ekspansi, dilanjutkan selama 48 jam menggunakan metode tetes gantung (hanging drop). Induksi dengan molekul kecil kombinasi VC6TFZ selama 14 hari, kemudian medium diganti dengan medium 2i (PD0325901 dan CHIR) selama 7 hari. Identifikasi iPSC (induced-pluripotent stem cell) berdasar morfologi dan ekspresi petanda pluripoten OCT4 dan SOX2 secara imuno-histokhemistri. Koloni sel pluripoten muncul pada hari ke 9 proses reprograming, yang berupa sel bulat, besar, seperti batu paving dan ekspresi OCT4 dan SOX2 yang meningkat dibandingkan kontrol. Sebagai kesimpulan kombinasi molekul kecil VC6TFZ dapat menginduksi dedifensiasi dari sel somatik darah tepi mononuklir menjadi sel pluripoten dengan ditandai adanya sel bulat, besar seperti batu paving dengan ekspresi OCT4 dan SOX2 yang meningkat.
Penulis: Aprihati Aprihati, B.S.Pikir, Andrianto Andrianto
Sumber terkait tulisan di atas:
Aprihati Aprihati, BS Pikir, Andrianto Andrianto. Generation og Human-induced Pluripotenr Stem Cell from Peripheral Blood Mononuclear Cell using Small-Molecule compound VC6TFZ. Open-access Macedonian Journals of Medical Sciences. 2020, May 06;8(A):250-255. DOI: https://doi.org/10.3889/oamjms.2020.3862
