Pada bulan Desember 2019, coronavirus RNA telah ditemukan di Provinsi Hubei, Cina. Ini menyebabkan sindrom gangguan pernapasan akut dan kegagalan multiorgan yang cepat. Coronavirus adalah virus yang mengandung untai tunggal RNA sense positif. Protein spike merupakan salah satu protein dan struktur antigen utama dalam virus. Protein tersebut terbuat dari protein yang terglikosilasi. Bagian amplop, membran, dan protein nukleokapsid adalah protein struktural lainnya. Sebagian besar pasien mengalami kesulitan bernapas dalam satu minggu dan beberapa penyakit berkembang menjadi ARDS dan beberapa inflamasi lainnya. SARS-CoV-2 ditularkan dari manusia ke manusia melalui droplet.
Partikel SARS-CoV-2 bertanggung jawab atas masuknya virus dan menginduksi kekebalan bawaan dan adaptif. Host protein ACE-2 akan diikat oleh virus protein spike1 (S1). Kemudian, partikel virus akan melakukan proses endositosis. Virus ssRNA akan dideteksi oleh sistem kekebalan melalui TLR7 dan TLR8 dan faktor transkripsi akan mengaktifkan NF-κB dan jalur MAPK untuk menginduksi ekspresi sitokin pro inflamasi pada pejamu. ssRNA dan virus dsRNA dihasilkan sebagai perantara dalam replikasi virus, dan itu akan dikenali oleh RIG-I dan MDA5 yang selanjutnya menginduksi ekspresi IFN tipe I yang mengarah ke keadaan antivirus. MHC kelas I akan mempresentasikan viral peptida ke sel T sitotoksik CD8 +. sel T sitotoksik CD8 + akan menjadi aktif dan mulai membelah dan menunjukkan ekspansi klon dan mengembangkan virus spesifik efektor dan sel T memori. Sel jaringan yang terinfeksi akan dilisiskan oleh sel T CD8+. Semua virus dan partikelnya akan dikenali oleh APC dan kemudian akan dipresentasikan ke sel T CD4 + melalui MHC kelas II. sel B sendiri dapat langsung mengenali virus dan itu akan aktif secara otomatis. Sel B juga dapat membuat interaksi dengan sel T CD4+. Sel B berkembang menjadi sel plasma dan meningkatkan produksi antibody spesifik untuk virus dengan tipe IgM, IgA dan IgG.
Pada awal minggu pertama onset gejala, IgM dan IgA terdeteksi, sedangkan IgG terdeteksi sekitar 14 hari setelah gejala. Satu dari tes untuk mendiagnosis COVID-19 adalah deteksi serologis antibodi, dan tes ini mendeteksi IgM, IgG, atau antibodi total (biasanya dalam darah) terhadap SARS-CoV-2. Ada banyak metode untuk deteksi serologi antibodi termasuk ELISA, LFIA, dan chemiluminescent immunoassay. Namun, LFA, CLIA dan ELISA terbatas dalam sensitivitas dan spesifisitas. Dalam beberapa tes, hasil positif palsu dan negatif palsu masih ditemukan. Kegagalan untuk mendeteksi orang dengan COVID-19 dapat menyebabkan penundaan pengobatan dan risiko penyebaran infeksi lebih lanjut kepada orang lain. Oleh karena itu, dalam artikel ini, penulis ingin mendiskusikan evaluasi untuk diagnosis atau skrining kasus COVID-19 berdasarkan deteksi antibodi.
Profil Antibodi pada COVID-19
Produksi antibodi IgA, IgM, dan IgG positif muncul di awal-awal setelah timbulnya gejala. Antibodi IgM/IgA serta IgG antibodi dapat dideteksi dari 5 hingga 14 hari PSO. Pada saat ini kadar antibodi IgA lebih tinggi dibandingkan dengan antibodi IgM. IgG secara konsisten lebih tinggi dari tingkat IgM yang menyebabkan antibodi IgG berada di dalam tubuh dalam waktu yang lama dan mampu berkontribusi untuk jangka panjang pada kekebalan memori terhadap SARS-CoV-2. Menariknya, Zhang dkk. menemukan bahwa peningkatan respon IgG memiliki korelasi dengan tingkat keparahan penyakit. Bisa menjadi penanda untuk membedakan tingkat keparahan. Studi lain juga menunjukkan bahwa spesifisitasnya juga sangat baik untuk IgG (100%), tetapi spesifisitasnya berbeda secara signifikan antara IgA (78,9%) dan IgM (95,8%) dalam 14 hari setelah onset gejala. Menggabungkan IgM dan IgG untuk deteksi SARS-CoV2 menjadi dasar diagnosis dan skrining COVID-19. Untuk diagnosis dini, kita bisa menggunakan IgM dan IgG untuk membantu memantau status COVID-19 status.
Kegunaan tes antibodi: i) untuk menegakkan diagnosis pasien dengan kondisi khusus dan yang mengalami beberapa gejala; ii) untuk melacak transmisi; iii) untuk mengetahui potensi penyakit kekebalan atau lainnya penyakit; dan iv) untuk studi sero-epidemiologi, untuk memahami penyebaran COVID-19. Metode yang digunakan untuk deteksi antibodi adalah ELISA, CLIA, dan LFIA. Semua metode dibuat untuk mendeteksi Imunoglobulin Antibodi G dan/atau Imunoglobulin M terhadap protein virus S (terutama RBD) dan/atau N dari sampel serum/darah manusia.
Evaluasi Tes Antobodi
Hasil penelitian orang Taiwan tentang kemampuan tes cepat- antibodi IgM dan IgG dari 14 pasien COVID-19 masing-masing adalah sensitif (78,6%) dan spesifisitas (100%),. Sedangkan berdasarkan studi lain, tes LFIA menunjukkan bahwa kombinasi IgG dan IgM adalah lebih sensitif daripada mendeteksi salah satu antibodi saja. Kombinasi Imunoglobulin Kaset ICT G-Immunoglobulin M cocok untuk skrining cepat infeksi SARS-CoV-2 di antara pasien positif COVID-19, pasien suspek dan pembawa SARSCoV-2 tanpa gejala. Beberapa tes LFIA telah menunjukkan hasil positif palsu; Ada beberapa penyebab dalam hasil yang salah seperti reaktivitas silang antibodi non-spesifik (misalnya telah terpapar jenis virus corona lainnya). Kita harus mengumpulkan penuh informasi termasuk asal daerah, kelompok etnis, umur dan penyakit imun lainnya.
Hasil penelitian berdasarkan uji ELISA menunjukkan bahwa deteksi IgG, IgA, dan IgA gabungan, IgG memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang lebih tinggi pada> 10 hari setelahnya timbulnya gejala. Selain itu, untuk metode CLIA, sensitivitas adalah 65,5%, 88,8% dan 100,0% saat diuji dalam 0-6 hari, 13 hari dan 14 hari setelah onset gejala dengan spesifisitas yang tinggi (99,8%).
Meta-analisis menunjukkan bahwa ELISA dan LFIA memiliki spesifisitas tinggi. CLIA dan ELISA memiliki sensitivitas yang lebih baik (90% –96%) dan diikuti oleh LFIA dan FIA (80% hingga 89%). Berdasarkan ketiga metode tersebut, kekhususannya tinggi ketika diuji pada pasien COVID-19 tetapi tidak tersangka.
Sementara itu, Spesifisitas LFIA dan CLIA adalah lebih rendah ketika diuji pada pasien positif dengan COVID-19. Spesifisitas LFIA lebih rendah ketika diperkirakan pada pasien dengan infeksi virus lainnya, sementara ELISA atau CLIA lebih tinggi. Positif palsu dan negatif palsu masih ditemukan di banyak tes. Reaksi silang dengan jenis coronavirus lainnya dapat membuat tes antibodi kurang spesifik dan membuat hasil positif palsu. Sementara itu, negatif palsu disebabkan oleh waktu diagnosis yang salah dan rendahnya antibodi karena perbedaan antar individu dalam respon imun.
Solusi
Diagnostik serologis berguna untuk mendiagnosis pasien dengan sindrom gangguan pernapasan akut dan negative pemeriksaan PCR. Pengambilan spesimen dianjurkan pada minggu ke-2 penyakit. Ada 2 hal yang harus dipahami untuk diagnosis dini COVID-19 berdasarkan deteksi antibodi: window period untuk diagnosis harus dipersingkat dan spesifisitas harus ditingkatkan. Sensitivitas antibody bisa lebih tinggi dari tes RNA dalam 8-21 hari setelahnya PSO. Selama fase akut dan konvalesen, memahami interaksi virus dan pejamu itu penting untuk dapat mengetahui kedua waktu awal serokonversi setelah terpapar SARS-CoV-2 dan durasi antibodi berikut. Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa penggunaan antigen S lebih sensitif dari antigen N dalam tes ELISA. Karena Antigen S memiliki sensitivitas yang lebih tinggi karena memiliki respon kekebalan lebih awal terhadap antigen ini, lebih khusus, dan reaktivitas silang dengan coronavirus lain lebih rendah. Kondisi pasien dan stadium penyakit dapat dipertimbangkan saat mengumpulkan sampel untuk mendukung keakuratan diagnosis. Kualitas pengambilan sampel yang baik saat hari pertama sakit atau gejala pada saluran pernafasan bagian atas, sedangkan untuk tahap selanjutnya, penggunaan dahak lebih banyak sensitive.
Penulis: Prof. Dr. Theresia Indah Budhy, drg., M.Kes
Link artikel :
https://medic.upm.edu.my/upload/dokumen/202104291546112021_0018_40.pdf
